|
Description
|
ศึกษาการผลิตหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมชนิดน้ำแบบสารแขวนลอยสปอร์ สามารถผลิตได้โดยการเลี้ยงเชื้อราเมตาไรเซี่ยมบนอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA (Potato Dextrost Augar) แล้วทำการแยกสปอร์โดยเดิมสารละลาย Tween-80 ความเข้มข้น 0.1 % (1 มิลิลิตรต่อน้ำกลั่น 1000 มิลิลิตร) โดยผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อเป็นเวลา 20 นาที นำ Tween-80 ความเข้มข้น 0.15 % ปริมาตรที่ผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อด้วยหม้อนึ่งความดันเติมปริมาตร 70 มิลลิลิตรต่อ 1 ขวดแบนที่ทำการบ่มเลี้ยงเชื้อราเมตาไรเซี่ยมแล้วใช้เข็มเขี่ยเชื้อเขี่ยให้สปอร์ให้หลุดออกจากอาหารเลี้ยงเชื้อ PDA จากนั้นจึงกรองแยกสปอร์ด้วยชุดกรอง โดยนำไปเจือจางให้ได้ความเข้มข้นสปอร์ที่ 1:1000 เท่า จึงนำไปนับจำนวนสปอร์ด้วย Hemocytometer ด้วยการนำหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมที่ได้จากการกรองไปเจือจางกับ Tween-80 ความเข้มข้น 0.15 % โดยผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อไปนับสปอร์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ได้ 1.2x109 สปอร์ต่อมิลลิลิตร ซึ่งอยู่ในเกณฑ์มาตรฐานของความเป็นสปอร์ที่จะสามารถนำมาทำหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมและใช้ในการผลิตขยายเชื้อราเมตาไรเซี่ยมพร้อมใช้ได้
ผลการหาอัตราการนำหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมชนิดน้ำแบบสารแขวนลอยสปอร์ไปใช้การผลิตขยายเชื้อราเมตาไรเซี่ยมแบบพร้อมใช้แบ่งการศึกษาออกเป็น 7 กรรมวิธีกรรมวิธีละ 4 ซ้ำ โดยแต่ละกรรมวิธีใช้ปริมาณของหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยม โดยการใช้หัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมในเมล็ดข้าวฟ่าง 1 ช้อนชา (ประมาณ 30 เม็ด) และหัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยมชนิดน้ำแบบสารแขวนลอยสปอร์ที่ปริมาณ 0.5 มิลลิลิตร , 1 มิลลิลิตร , 2 มิลลิลิตร , 3 มิลลิลิตร , 4 มิลลิลิตร และ 5 มิลลิลิตร พบว่าอัตราการใช้เชื้อราเมตาไรเซี่ยมแบบสารแขวนลอยสปอร์ที่ให้ผลดีที่สุดคือ กรรมวิธีที่ 3 อัตราการใช้หัวเชื้อราเมตตาไรเซี่ยมที่ปริมาณ 1 มิลลิลิตรต่อข้าวหุง 200 กรัม ซึ่งให้จำนวนของสปอร์อยู่ที่ 5.03x109 สปอร์ต่อมิลลิลิตร และกรรมวิธีที่ได้จำนวนสปอร์น้อยที่สุดคือกรรมวิธีที่ 7 อัตราการใช้อัตราการใช้หัวเชื้อราเมตาไรเซี่ยม 5 มิลลิลิตรต่อข้าวหุง 200 กรัม ซึ่งให้จำนวนของสปอร์อยู่ที่ 2.18x109 สปอร์ต่อมิลลิลิตร
|