|
Title
|
การใช้วิธี Multiplex PCR จำแนกเชื้อ Campylobacter spp. ที่เพาะแยกได้จากลำไส้ไก่ |
|
Creator
|
นางสาวพัชราวลัย ถิรพัฒน์ |
|
Description
|
ที่มาของการศึกษา: เชื้อ Campylobacter spp. เป็นแบคทีเรียที่เป็นสาเหตุสำคัญของการเกิดโรคอุจจาระในคน การติดเชื้อในคนส่วนใหญ่จะบริโภคอาหารที่ปนเปื้อนเชื้อมาจากสัตว์ต่างๆ โดยเฉพาะสัตว์ปีก เช่น ไก่ และไก่งวง เชื้อ Campylobacter spp. ที่ก่อโรคในไก่ประกอบไปด้วย C. jejuni และ C. coli ซึ่งเป็นชนิดที่พบมากที่สุดในสัตว์ปีกและทำให้เกิดโรคในคนได้อย่างมีนัยสำคัญ การศึกษาครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อจำแนกสปีชีส์ของเชื้อ Campylobacter spp. ที่เพาะแยกจากตัวอย่างลำไส้ไก่ด้วยวิธี Multiplex PCR
วิธีการ: ตัวอย่างลำไส้ไก่ 45 ตัวอย่าง ทำการเพาะเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อ Preston broth บ่มที่ 42 ?C นาน 24 ชั่วโมง จากนั้นหยดเชื้อบน Membrane filters ขนาด 0.45 ?m ที่วางอยู่บนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ Blood agar No.2 บ่มที่ 42 ?C นาน 48 ชั่วโมง ภายใต้ Microaerophilic system ตรวจสอบโคโลนีแล้วนำเชื้อสงสัยมาย้อมสีด้วย Congo red ตรวจยืนยันและจำแนกสปีชีส์ C. jejuni และ C. coli ด้วย วิธี Multiplex PCR
ผล: จากการเพาะแยกเชื้อลำไส้ไก่ 45 ตัวอย่าง พบเชื้อ 10 ตัวอย่าง 11 isolated โดยลักษณะของโคโลนีบน Blood agar No. 2 มีสีเทาขนาดเล็ก เมื่อนำไปย้อมสี Congo red พบว่าเซลล์ของเชื้อมีรูปร่างโค้งงอคล้ายปีกนก และเมื่อทดสอบด้วยวิธี Multiplex PCR ยืนยันว่าเป็นเชื้อ Campylobacter spp.ทั้ง 10 ตัวอย่าง (22.22%) โดยพบว่าเป็นเชื้อ C. coli (13.32%) C. jejuni (6.66%) C. coli และ C. jejuni ทั้งสอง
สปีชีส์ (2.22%) ตามลำดับ
สรุป: จากการศึกษาครั้งนี้สามารถเพาะแยกเชื้อ Campylobacter spp.ได้อย่างถูกต้อง และสามารถจำแนกสปีชีส์ของเชื้อ C. coli และ C. jejuni ได้อย่างแม่นยำด้วยวิธี Multiplex PCR ซึ่งมีประสิทธิภาพสูงในการยืนยันเชื้อและจำแนกชนิดของเชื้อที่เป็นสาเหตุของโรค ซึ่งสามารถนำผลการศึกษานี้ไปใช้ประโยชน์ในการประเมินความเสี่ยงในการเกิดโรคและพัฒนาวิธีการป้องกันการแพร่ระบาดของเชื้อในฟาร์มไก่ รวมถึงการลดการสูญเสียที่อาจเกิดขึ้นจากการติดเชื้อในอนาคต
|
|
Subject
|
เทคนิคการสัตวแพทย์, คณะวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี |